甲基化检测（Sequenom平台）-分子生物学服务 -技术服务-生物在线

产品名称：甲基化检测（Sequenom平台）

英文名称： Gene Methylation Test (Sequenom Platform)

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产品价格： 100

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纽恩（上海）生物科技有限公司

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Sequenom甲基化实验服务步骤

1、检测位点确认，根据目的片段和样品来源，在NCBI中对兴趣位点进行预测和标注。

2、反应方案和引物设计

3、使用亚硫酸盐，将样本DNA 中没有甲基化的C 全部转化为U（相当于DNA 中的T）。

4、使用特殊设计的一对引物扩增样本，得到带有T7 RNA 聚合酶启动子序列的扩增产物。

5、在体外转录体系中，利用T7 RNA 聚合酶，将扩增产物转录为RNA 片断。

6、在步骤3 的体系中，利用RNase A 能够特异性识别并切割RNA 中U 3’端的特性，将RNA 片

断切割成携带有CpG 位点的小片断。相同的片断中，

7、使用sequenom®MassArray 飞行质谱分析系统检测产物。由于同一片断中，只有CpG 和CpA之间16Da 的分子量差别，即质谱图中两者峰的差距。