MultiPCR 区域甲基化测序服务

内容简介

伴随EWAS芯片技术在DNA甲基化的广泛应用，及多基因复杂疾病的表观遗传研究，更多易感的5mC位点及区域发现，由此需要高通量、高准确度、价格低廉的检测技术满足大样本检测的需求。

博淼生物结合多重PCR扩增子技术和NGS技术，针对靶向区域进行DNA甲基化定量检测。

技术原理

多重PCR扩增子NGS靶向DNA甲基化定量技术技术原理，首先通过重亚硫酸盐处理，甲基化的C被保护，而未甲基化的C则被修饰为U；其次通过基于多因素算法设计合成目标区域特异的DNA甲基化多重PCR扩增引物，分别以上述CT处理之后的DNA单链为模板进行目标区域的多重扩增，每个多重PCR反应体系中最多可以容纳100个片段，每个区域长度在100-250bp；再者通过磁珠纯化产物并根据不同反应体系的扩增产物扩增，通过第二轮带有测序接头的通用PCR引物进行扩增建库；最终将建库产物进行超高深度NGS测序，平均测序深度可达1000×以上，根据CpG site中非甲基化和甲基化对应的T和C碱基的测序reads数量进行单个5mC位点的甲基化程度统计。

服务项目

技术优势

·整体DNA甲基化技术解决方案

·超高重的测序深度

·完善而创新的EWAS芯片位点优化策略

·丰富的引物设计经验