支原体污染整体解决方案

------支原体检测、预防、去除，一步到位！

支原体

支原体（Mycoplasma）又称霉形体，是目前发现的最小、最简单的原核生物，直径大小0.1~0.3μm，能通过滤膜且呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分支状等多种形态。实验室和生物制品工厂在细胞培养过程中易受到支原体污染，据文献报道：支原体污染在储存细胞系中发生率约为 15%-35%，在生物制药行业中约为0.44%-6.70% ^[1]。

图1：支原体的形态

支原体污染的影响

细菌和真菌污染相对较容易检测、预防和去除，但支原体造成的污染却很难察觉，即使生长密度高达 10⁷-10⁹CFU/ml，也很难有污染迹象（比如溶液浑浊、pH变化等）。支原体污染后能导致细胞产生多种变化（见图2）。

图2：受支原体污染后细胞出现的相关状态的改变

支原体污染解决方案——Yeasen三位一体帮您解决细胞支原体污染问题

翌圣生物（YEASEN）经过匠心开发并多次的实验验证，推出了清除支原体的试剂，包括：支原体检测系列、支原体清除（培养箱、水浴锅、超净台和细胞房）和支原体预防相关等。

图3：yeasen支原体污染整体解决方案

一步法恒温支原体检测：

Yeasen一步法恒温支原体检测试剂采用等温扩增技术，无需特殊仪器，1h就可以通过颜色判定检测结果。检测灵敏度是普通恒温检测的1000倍并添加了防污染组分，杜绝假阳性现象的发生。

图4：一步法支原体检测操作流程

PCR法支原体检测：

Yeasen巢式PCR支原体检测不同于普通的PCR检测方法，将原有的1对引物提高至3对引物，针对支原体16s和23s保守区进行巢式PCR扩增，实现了准确度和灵敏度的双重突破。

图5: PCR法扩增含不同浓度支原体样品获得的凝胶电泳图

qPCR法支原体检测：

Yeasen的qPCR支原体检测试剂盒（探针法）是基于EP药典推荐NAT法推出超简便快捷检测方法，克服了普通PCR灵敏度低和培养法耗时久的问题，将结果精准度和使用便捷度有了质的提升！3h内可快速、简便检测支原体存无，优于培养法的28天耗时检测过程。

图6: qPCR法测试流程

产品数据

灵敏度和扩增效率测试

10 CFU/mL口腔支原体标准品检出结果

10 CFU/mL肺炎支原体标准品检出结果

10 CFU/mL猪鼻支原体标准品检出结果


10 CFU/mL精氨酸支原体标准品检出结果

试剂盒扩增效率：101-108 copies/uL

扩增效率≥96%，标准曲线R2≥0.996

不同检测方法对比

翌圣MycAway^TM 支原体去除试剂（1000×）是一种混合制剂，可通过抑制支原体生长所必须的相关蛋白合成来达到支原体清除效果且对细胞无伤害，最大程度上挽救您的细胞，减少因支原体污染带来的损失。